角分辨散射仪的操作经验分享

　　角分辨散射仪是以特定频率入射光照射这些粒子，它们不吸收入射光能量，而仅作为二次波源向各个方向发射与入射光频率相同的球面散射光，这种没有频率位移（即无能量变化）的散射称为弹性光散射（elastic light scattering），也常称为经典光散射（classical light scattering）、静态光散射（static light scattering）在静态光散射情况下，通常用来表征一个体系的散射能力和角度依赖性。

　　角分辨散射仪谱操作规程：

　　1、开机前准备：水：蒸馏水，有机溶剂：色谱纯。缓冲盐溶液：配置完成后过2层0.22um滤膜。流动相需准备充足。

　　2、系统平衡：根据需要选择凝胶柱以及需要连接的检测器。开启脱气机，泵、柱温箱、检测器以及电脑开关。点击quick start pump进行流速设置，点击ASTRA进行实验方法设置。提前24小时将流速调至试验所需流速进行系统平衡，其中注意流动相过渡问题，待检测器冲平后可进行进样分析。

　　3、进样：建议标准样品归一化处理，用于激光18角度校正，建议进样前进行该处理。多糖需用3-5mg/mL分子量为五万以下的右旋糖酐进行激光，蛋白质以2-4mg/mL的BSA作为归一化样品。所以样品离心后取上层清液过0.45um滤膜。手动进样器扳至load状态进行进样，一般需进3-5倍进样环体积以清洗进样环，点击软件中运行后将进样器扳至Inject状态进行数据采集。

　　4、数据分析：数据采集后需进行定基线、峰等数据处理，依据实验需要提前实验数据。所有数据可以通过图表中邮件中edit进行数据导出。

　　5、关机：色谱柱和系统清洗-流动相冲洗2-3个小时，根据流动相性质选择合适溶剂过渡，如缓冲盐流动相冲洗后需用万分之二叠代钠清洗一晚上后换20%甲醇冲洗足够时间后，进行色谱柱保存，关闭仪器电源。实验完成后做好登记工作。